蒸發(fā)光檢測器響應(yīng)和濃度的關(guān)系是什么?
蒸發(fā)光檢測器測定含量是必須用標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算的嗎?不能像紫外一樣應(yīng)用外標(biāo)來算嗎?如果只能用標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算,那么考察一個品種的長期穩(wěn)定性的時候是一直都可以應(yīng)用方法學(xué)建立時的標(biāo)曲嗎?還是每一次開機都需要一個做標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算呀?
在建立方法時要測試方法的線性范圍(其實就是標(biāo)準(zhǔn)曲線)。如果是隔了很長一段時間,再用此方法以相同的儀器(包括液相和檢測器)測定,可以就跑一個中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,用這個點計算。就是你說的外標(biāo)法。但是若換了儀器,建議從新測試線性范圍,再定量。
蒸發(fā)光檢測器設(shè)計用于液相色譜系統(tǒng),分析任何揮發(fā)性低于流動相的化合物。ELSD ELSD的應(yīng)用范圍包括:碳水化合物,藥物,脂類,甘油三脂,未衍生的脂肪酸和氨基酸,聚合物,表面活化劑,營養(yǎng)滋補品,及組合分子庫等。
蒸發(fā)光檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復(fù)雜化,并且由于對溫度極其敏感使得基線很不穩(wěn)定,與梯度洗脫不相容。另外,示差檢測器的響應(yīng)不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾,并要求被分析化合物帶有發(fā)色團。ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線,使得分辨率更好、分離速度更快。另外,因為ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性,所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團或熒光基團。